表1.已上市GalNAc-siRNA藥物ADME性質對(duì)比（上下滑動查看）

近期，Alnylam Pharmaceuticals研究人員在Drug Metabolism and Disposition上發(fā)表相關綜述。分享GalNAc-siRNA産品非臨床吸收、分布、代謝以及排洩(ADME)數據在不同種(zhǒng)屬間的一緻性，非臨床向(xiàng)臨床數據的轉化、臨床數據可預測性等；同時提出，在缺少臨床肝髒PK特征時，可優化臨床有效、安全劑量。

1、GalNAc-siRNAs藥物在體内循環系統中維持雙鏈結構

雙鏈在循環系統中穩定存在，單鏈快速地經(jīng)核酸酶代謝。體内研究顯示：在大鼠、食蟹猴及人血漿中AS鏈、SS鏈幾乎以1:1存在，如圖2所示。

GalNAc-siRNAs 在循環系統中以雙鏈形式存在，測定的單鏈AS鏈濃度水平能(néng)夠反映出完整的雙鏈濃度水平。

2、吸收（Absorption）

GalNAc-siRNAs藥物皮下注射給藥後(hòu)，藥物會迅速吸收入血，從血漿中快速清除（主要由ASGPR介導快速被肝攝取）。給藥劑量低于10 mg/kg劑量時，在大鼠、食蟹猴以及人血漿中PK暴露量呈劑量比例增加，兩(liǎng)者相關性較好(hǎo)，在人血漿中可通過(guò)異速縮放進(jìn)行預測；給藥劑量大于10mg/kg時，可能(néng)由于ASGPR介導的攝取清除的飽和的暫時飽和，血漿暴露增加，血漿中、藥物暴露量水平可能(néng)會高于劑量比例增加。如圖3所示。

GalNAc-siRNAs藥物生物利用度變異很大，在考察生物利用度時，需考慮劑量盡可能(néng)低避免ASGPR介導的飽和，同時劑量盡可能(néng)高以便于AUC能(néng)夠準确代表血漿暴露量。ASGPR介導快速分布于肝髒組織，GalNAc-siRNAs在血漿在暴露是有限的。因此，劑量設定時要相對(duì)較高的劑量水平來确保檢測足夠長(cháng)時間來表征血漿PK參數，尤其在靜脈輸注時，更需考慮最佳劑量及優化采血時間點。

3、分布（Distribution）

一般情況下，皮下給予藥效劑量後(hòu)，在大鼠肝髒中暴露約63%藥物劑量，在猴肝髒中約87%藥物暴露。皮下注射（SC）給藥時，随給藥劑量增加，在肝髒分布反而減少後(hòu)，但較靜脈注射（IV）給藥分布更高。

ASGPR主要在肝髒中表達。QWBA數據顯示：GalNAc-siRNAs藥物，主要分布于肝髒，肝外組織中如腎髒、淋巴結、腎上腺、胰腺、空腸和骨髓分布較少，而腦和心髒中藥物分布幾乎可忽略不計。

皮下注射時，少量藥物（＜10%）滞留于注射部位或淋巴系統，從而限制延遲釋放到體循環的高濃度的可能(néng)性。

4、代謝（Metabolism）

給予GalNAc-siRNAs藥物，GalNAc片段在溶酶體運輸過(guò)程中迅速被β- N -乙酰氨基葡萄糖酶清除、連接子結構進(jìn)一步被肝細胞中的酰胺酶代謝、雙鏈siRNA通過(guò)血液和組織中核酸内切酶和核酸外切酶降解代謝。核酸外切酶作用于鏈的末端，導緻單核苷酸的釋放，而内切酶作用于鏈内導緻鏈長(cháng)度改變。GalNAc-siRNAs代謝特征如圖4所示。

與完整siRNA相比，AS(N-1)3´可能(néng)與母藥活性相當，是最主要的活性代謝産物，5´核酸的丢失可能(néng)導緻其成(chéng)爲非活性代謝産物。主要代謝路徑如圖5所示。

5、排洩（Excretion）

GalNAc-siRNAs藥物主要通過(guò)腎髒排洩。腎損傷時，腎髒排洩減少、血漿中暴露量可能(néng)暫時增加，但肝髒中PK(C_max, AUC)或PD效果(mRNA Reduction )不會産生顯著影響。

6、肝靶組織PK-PD模型

GalNAc-siRNA藥物PK-PD模型建立的難點在于：一是血漿PK和藥物的PD并沒(méi)有直接的相關性。二是血漿半衰期與PD發(fā)揮作用時間的脫節。即siRNA 藥物的血漿峰濃度和最大效應之間通常存在一定的滞後(hòu)，血漿動力學(xué)過(guò)程和靶組織中效應動力學(xué)過(guò)程在時間上不一緻即短時間的血漿暴露可以在組織中産生長(cháng)期的效應。

GalNAc-siRNAs藥物旨在肝靶向(xiàng)分布，PD作用效果(靶細胞中基因沉默效應)與肝半衰期及肝髒或RISC中結合siRNA的暴露量（AS鏈的數目）有關。因此，肝半衰期及RISC-siRNA數據，可特征性标準GalNAc-siRNAs藥物PK。建立基于血漿中靶蛋白的減少量(PD)與RISC-負載的siRNA濃度(PK)的PK-PD模型，通過(guò)異速縮放預測人體有效劑量。